大鼠白介素12(IL-12P70)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理基于?雙抗體夾心法?，通過特異性抗體捕獲目標(biāo)蛋白并放大信號(hào)，實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。以下是詳細(xì)解析：
1. ?核心原理?
雙抗體夾心?：試劑盒采用兩種高親和力抗體，分別針對(duì)IL-12P70的不同表位。
包被抗體?：預(yù)包被在酶標(biāo)板上的抗大鼠IL-12單抗，捕獲樣本中的IL-12P70?。
檢測(cè)抗體?：生物素標(biāo)記的抗IL-12抗體，與已結(jié)合的IL-12P70形成“夾心"復(fù)合物?。
信號(hào)：通過辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)與生物素結(jié)合，催化底物顯色(TMB)，顯色強(qiáng)度與IL-12P70濃度成正比?。
2. ?實(shí)驗(yàn)流程?
樣本孵育?：標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣本與包被抗體反應(yīng)，特異性結(jié)合IL-12P70?。
洗滌?：去除未結(jié)合物質(zhì)，減少背景干擾?。
檢測(cè)抗體孵育?：生物素化抗體與IL-12P70結(jié)合，形成復(fù)合物?。
酶標(biāo)記物反應(yīng)?：HRP-鏈霉親和素與生物素結(jié)合，催化TMB顯色?。
終止與檢測(cè)?：加入終止液后，在450nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度(OD值)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度?。
3. ?技術(shù)特點(diǎn)?
高特異性?：抗體僅識(shí)別IL-12P70(p35/p40異源二聚體)，避免與其他亞型(如p40同源二聚體)交叉反應(yīng)?。
靈敏度?：檢測(cè)限通常為0.156-10ng/mL，適用于低濃度樣本?。
樣本兼容性?：支持血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等樣本類型?。
4. ?應(yīng)用場(chǎng)景?
研究?：評(píng)估Th1/Th2細(xì)胞平衡及IFN-γ分泌水平?。
疾病模型?：如哮喘、腫瘤微環(huán)境中的IL-12動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)?。
注意事項(xiàng)
樣本處理?：避免反復(fù)凍融，尿液樣本需離心去除顆粒物?。
干擾因素?：NaN3會(huì)HRP活性，需避免使用含防腐劑的樣本?。
注：僅供科研使用，以上資料供參考，如需具體產(chǎn)品說(shuō)明請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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