人角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū) 以下是關(guān)于人角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明綜合整理： BS-0186 人角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)ELISA試劑盒 一、實(shí)驗(yàn)原理 采用雙抗體夾心法(或雙抗原夾心法)檢測(cè)樣本中KGF濃度。通過(guò)包被抗體/抗原與待測(cè)物結(jié)合，再與酶標(biāo)抗體形成復(fù)合物，經(jīng)TMB顯色后測(cè)定OD值，濃度與顏色深淺成正比。 二、試劑盒組成 主要組分? 預(yù)包被微孔板(96孔或48孔) 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干粉，通常含2-8管，濃度0-400 pg/mL不等) 酶標(biāo)抗體、生物素化抗體、HRP標(biāo)記親和素(不同品牌配置差異) TMB底物液、終止液(2N H?SO?) 濃縮洗滌液(需20-30倍稀釋) 自備物品? 酶標(biāo)儀(450nm)、移液器及槍頭 37℃恒溫箱、蒸餾水 三、樣本處理 樣本類(lèi)型 處理方法 血清? 室溫凝固10-20分鐘后，2000-3000rpm離心20分鐘，避免溶血 血漿? EDTA/肝素抗凝，離心后取上清 細(xì)胞上清? 1000-3000rpm離心10-20分鐘去除顆粒 組織勻漿? PBS勻漿后離心取上清，分裝保存于-20℃ 注意?：避免反復(fù)凍融;NaN?會(huì)抑制HRP活性，需排除此類(lèi)樣本。 四、操作步驟 試劑準(zhǔn)備? 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶：加入指定體積稀釋液(如0.5-1mL)，靜置10分鐘混勻。 洗滌液稀釋?zhuān)喊?:19~1:20比例用蒸餾水配制。 檢測(cè)流程? 加樣：標(biāo)準(zhǔn)品/樣本每孔50-100μL。 孵育：37℃溫育60-120分鐘。 洗板：手工或洗板機(jī)洗滌4-6次，拍干。 加酶標(biāo)抗體：每孔100μL，37℃孵育60分鐘。 顯色：加入TMB底物，避光反應(yīng)15分鐘。 終止：加入終止液后15分鐘內(nèi)測(cè)定450nm OD值。 五、注意事項(xiàng) 保存條件?：未開(kāi)封試劑盒2-8℃保存;溶解后標(biāo)準(zhǔn)品建議分裝凍存。 精密度?：批內(nèi)CV<10%，批間CV<12%。 干擾因素?：溶血、細(xì)菌污染、反復(fù)凍融可能導(dǎo)致假陽(yáng)性或濃度偏差。 注：以上資料僅供參考，如需具體品牌說(shuō)明可進(jìn)一步提供貨號(hào)查詢(xún)?cè)敿?xì)參數(shù)。 | 
