Elisa實驗—酶聯免疫吸附法試劑盒
ELISA(酶聯免疫吸附法)試劑盒是一種基于抗原-抗體特異性結合原理的免疫檢測工具，廣泛應用于生物標志物定量分析。以下是關鍵信息總結：
一、基本原理
通過固相載體表面包被的抗體/抗原捕獲目標分子，結合酶標記的二抗或抗原催化底物顯色，顯色強度與目標物濃度成正比。核心步驟包括固相化、免疫反應、酶催化及顯色檢測。
二、主要類型
雙抗體夾心法：適用于大分子抗原(如細胞因子)，需兩種特異性抗體分別結合抗原不同表位。
競爭法：適用于小分子物質(如激素)，樣本與標記抗原競爭結合有限抗體。
其他類型：間接法(測抗體)、捕獲法(測IgM)等。
三、試劑盒組成
固相載體：預包被抗體/抗原的微孔板。
酶標記物：辣根過氧化物酶(HRP)標記的二抗或抗原。
底物系統：常用TMB(四甲基聯苯胺)，顯色后終止反應測吸光度。
配套試劑：標準品、洗滌液、終止液等。
四、操作要點
樣本處理：血清/血漿需避免溶血，細胞上清需離心去雜質，分裝后凍存避免反復凍融。
標準曲線：推薦四參數或直線擬合，R²值需接近1。
加樣與洗滌：精確控制加樣量，洗滌需以減少背景信號。
五、應用場景
種屬覆蓋：人、小鼠、大鼠等，檢測血清、血漿、細胞上清等樣本。
靈敏度：可達pg/mL級(如小鼠IL-1β檢測限23.44 pg/mL)。
領域：炎癥因子、腫瘤標志物、激素等研究。
六、注意事項
試劑保存：未拆封4℃保存，拆后部分組分需-20℃凍存。
交叉驗證：建議與Western blot或質譜法聯用提高準確性。
如需具體試劑盒(如大鼠TNF-α檢測)，可參考聯科生物產品頁或華美生物ELISA庫。
注意：以上僅供參考，不作為實際數據，實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。 Elisa試劑盒
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