如何正確分裝ELISA樣本以避免反復(fù)凍融?

　　以下是ELISA樣本分裝避免反復(fù)凍融的規(guī)范操作指南，結(jié)合不同樣本類型和保存條件進(jìn)行說明：

　　一、分裝基本原則?

　　單次用量分裝?

　　根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求預(yù)估單次用量(如50-100μL/管)，分裝至無菌EP管或凍存管中?。

　　推薦使用帶螺旋蓋的凍存管(如1.5mL/2mL規(guī)格)，避免密封不嚴(yán)導(dǎo)致樣本蒸發(fā)或污染?。

　　標(biāo)記規(guī)范?

　　標(biāo)注樣本編號(hào)、日期、濃度(如適用)及凍融次數(shù)(初始標(biāo)記為0次)?。

　　二、分裝操作步驟?

　　血清/血漿樣本?

　　離心后立即分裝，避免長時(shí)間室溫放置導(dǎo)致蛋白降解?。

　　使用預(yù)冷凍存管(冰上操作)，分裝后快速密封?。

　　細(xì)胞上清/裂解液?

　　離心去除雜質(zhì)后，按200-500μL/管分裝(避免過滿導(dǎo)致凍裂)?。

　　組織勻漿液?

　　按1:9比例稀釋后分裝，建議每管≤1mL(減少凍融體積波動(dòng)影響)?。

　　三、凍存與解凍要點(diǎn)?

　　凍存條件?

　　短期保存?：-20℃(≤1個(gè)月)?

　　長期保存?：-80℃(≤6個(gè)月)或液氮(>6個(gè)月)?

　　解凍方法?

　　15-25℃水浴快速融化(避免冰晶破壞蛋白結(jié)構(gòu))?

　　解凍后立即使用，未用完部分丟棄(禁止二次凍存)?

　　四、特殊注意事項(xiàng)?

　　避免氣泡?：分裝時(shí)槍頭貼壁緩慢加樣，減少氣泡產(chǎn)生?。

　　凍存管選擇?：優(yōu)先使用無DNase/RNase的凍存管(尤其用于核酸相關(guān)檢測(cè))?。

　　凍融記錄?：每次凍融后更新標(biāo)記，建議凍融次數(shù)≤3次?。

　　通過規(guī)范分裝和凍存流程，可最大限度保持樣本穩(wěn)定性，確保ELISA檢測(cè)結(jié)果的可靠性。

　　注：以上僅供參考，不作為實(shí)際數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒

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