標(biāo)簽：Elisa 本生試劑盒 標(biāo)準(zhǔn)品 抗體 封板膜 一次性吸頭 大鼠試劑盒
以下是天正信達(dá)關(guān)于大鼠ELISA試劑盒加樣實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題的解答及解決方案：
一、加樣不準(zhǔn)確問(wèn)題
移液器校準(zhǔn)不當(dāng)
需定期用標(biāo)準(zhǔn)砝碼校準(zhǔn)移液器，特別是小體積加樣(如5-10μL)。
加樣時(shí)吸頭需垂直插入液體，緩慢勻速操作，避免氣泡產(chǎn)生。
加樣時(shí)間過(guò)長(zhǎng)
單次加樣時(shí)間控制在10分鐘內(nèi)，樣本較多時(shí)分批操作。
使用多道移液器可提高效率，減少孔間差異。
液體殘留或?yàn)R灑
加樣后檢查孔壁是否殘留液體，用吸水紙輕拭酶標(biāo)板表面。
加酶試劑時(shí)避免快速操作，防止液體濺出孔外。
二、樣本處理問(wèn)題
血清/血漿樣本
血清需靜置1-2小時(shí)后離心(3000rpm，15分鐘);血漿需采血后立即混勻抗凝劑再離心。
溶血或脂血樣本需離心后取上清，避免血紅蛋白干擾。
樣本保存不當(dāng)
短期存放于2-8℃，長(zhǎng)期保存需-20℃以下，避免反復(fù)凍融。
三、實(shí)驗(yàn)操作問(wèn)題
孵育條件不穩(wěn)定
溫育時(shí)使用恒溫箱(37℃±0.5℃)，避免溫度波動(dòng)。
封板膜需一次性使用，防止蒸發(fā)和污染。
洗滌不凈
每孔注滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)4-6次，最后拍干。
自動(dòng)洗板機(jī)需檢查管路是否堵塞。
顯色異常
TMB顯色需避光，反應(yīng)時(shí)間控制在15-30分鐘，及時(shí)終止。
若顯色過(guò)弱，檢查酶標(biāo)抗體活性或延長(zhǎng)孵育時(shí)間。
四、質(zhì)量控制建議
設(shè)置對(duì)照
必須包含空白孔、陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照，驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)有效性。
重復(fù)性差處理
復(fù)孔加樣需使用同一移液器，保持操作一致性。
板內(nèi)變異系數(shù)應(yīng)<15%，否則需排查加樣或洗滌問(wèn)題。
五、其他注意事項(xiàng)
試劑污染：避免使用含NaN3的緩沖液(抑制HRP活性)。
環(huán)境控制：操作臺(tái)需清潔，移液器吸頭一次性使用。
具體問(wèn)題可結(jié)合試劑盒說(shuō)明書(shū)調(diào)整。
注：以上資料僅供參考，不作為實(shí)際標(biāo)準(zhǔn)，具體請(qǐng)咨詢(xún)技術(shù)老師。
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